Kan man centrifugera fårskinn

Separation av proteiner från cellrester och fetter Centrifugera rören i 10 minuter, rpm vid 4°C. Vet du var det befinner sig i fällning eller i lösning i de oika lstegen? Centrifugera proverna i 15 minuter, rpm vid 4°C. En fråga: spelar det någon roll - liksom kan man dra en generell slutsats och i så fall varför - om ett protein är laddat eller neturalt för om det ska falla ut eller om det ska vara löst?

Justeringarna i pH handlar om att ändra lösligheten för olika proteiner. Varför skulle man inte vilja att "eftersläntrarna" som inte reagerat på pH 8,4 fortsätter att falla ut? Varför är det bra att pH är lägre vid detta steg, vad händer med materialets olika delar?

Quacker — Fd. Medlem Postad: 15 maj Häll sedan upp 40 ml av lösningen i ett nytt falconrör och kontrollera att pH ligger runt 4,5. Men vad som händer? De-protoneras fosfolipiderna då? Men vad är fördelen med det, då kan de ju binda upp proteinerna igen?

Tvätta fårskinn för hand

Samtidigt vill man ha viss marginal så man ligger tillräckligt långt under pI för proteinerna så de verkligen är positivt laddade. Sedan din fråga: Är det ett enzym du ska rena helt eller delvis? Men 8,4 - pH höjs dit. Jag har tänkt på att olika oönskade molekylers pI kan göra de fälls ut om man går till visst pH.

Nu är frågan varför man först går till 8,4 och sedan till 8 - speciellt går man i steg 2 till ett värde som ju i princip är det första! Vi mixar hjärta med aluminiumsulfat och sedan centrifugerar det - där det är supernatanten vi häller av och sparar. Häll sedan i provet i mixern, alla gruppernas prover hälls i och mixas i 3x30 sekunder. Låt provet stå i kylskåp i ca 10 minuter eller tills alla grupper har mätt pH.

Eller beror det på vad som finns i lösningen? Dock är det aluminiumsulfat det står i handledningen med ett undantag TACK! Jag kan inte komma på det. Är det centrifugeringen som öppnar upp cellerna? Du behöver Logga in eller Bli medlem först!

Kan man torka ett fårskinn i tumlaren? *imt*

Att pH är över 8 tänker jag är för man ska sedan hälla lösningen tillsammans med en katjonbytargel med karboxylsyregrupper, vilka jag tänker måste vara deprotonerade för att ha rätt effekt alltså vara negativt laddade så de kan binda de positivt laddade proteinerna. Kolla upp det! Ph är då ca 5,5 så molekylen är positivt laddad. Sulfatjoner är i då.

Centrifugering. Årskurs 7

Vilket jag spontant tänker det borde vara en risk för, att det sätter ihop sig med något positivt. Eller alltså, det blev en jämnare "soppa" men mer än så? Därför går man ner från pH 8,4? Själv vet jag inte vad det gör - jag vet bara att steget är när vi ska fälla uteventuella orenheter och proteiner efter jonbyteskromatografin. Men dessa ligger så nära.

Först en detalj: Du skriver genomgående aluminiumsulfat, men allt i din text tyder på att du har använt ammoniumsulfat. Att gå upp till pH 8,4 gör att vissa proteiner faller ut.

Sen höjs pH då till runt 8,4 vi skulle ligga mellan och man centrifugerar igen, vilket gör att något faller ut och man igen sparar - efter filtrering för att avlägsna fett som separerat ut vid första centrifugeringen - supernatanten så proteinet måste ju finnas däri. Och pH borde vara runt 8 inget vi skulle kolla men bufferten vi använder för att "tvätta" gelen är på det pH:t. Men nej, jag förstår inte hur du menade.

Tack för kommentaren.